小鼠癲癇動物模型構(gòu)建方法

小鼠癲癇動物模型是研究癲癇發(fā)病機制、評估抗癲癇藥物效果以及探索新的治療策略的重要工具。

以下是一些常用的小鼠癲癇動物模型構(gòu)建方法：

1.化學(xué)誘導(dǎo)模型：

 1.1紅藻氨酸（KA）模型：通過立體定向注射KA到小鼠的海馬或其他腦區(qū)來誘導(dǎo)癲癇發(fā)作。這種模型可以模擬顳葉癲癇的病理過程，尤其是海馬區(qū)域的神經(jīng)元損傷和細胞死亡。

 1.2鋰-匹羅卡品（Li-Pilo）模型：先給予小鼠鋰鹽，然后注射匹羅卡品來誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)（status epilepticus, SE），此模型可以發(fā)展為慢性自發(fā)性癲癇模型，適用于研究癲癇的慢性階段。

2.電刺激模型：

     最大電休克（MES）模型：通過給予小鼠一次高強度的電流刺激來誘發(fā)強直陣攣發(fā)作，這個模型常用于篩選抗癲癇藥物。

3.基因工程模型：

     利用基因編輯技術(shù)（如CRISPR-Cas9）敲除或過表達特定基因，創(chuàng)建與人類癲癇相關(guān)的遺傳模型。

在建模過程中，研究者需要仔細選擇合適的小鼠品系、藥物劑量、注射方式和監(jiān)測方法，以確保模型的可靠性和重現(xiàn)性。此外，應(yīng)嚴(yán)格遵守動物福利和倫理規(guī)定，

減少動物的不適和痛苦。

根據(jù)最新的研究進展，梨狀皮層注射KA建立的癲癇小鼠模型為癲癇發(fā)病機制的研究提供了新的動物模型，這種模型在急性期就能成功激發(fā)癲癇，且與海馬注射KA的

癲癇模型相比，癲癇發(fā)作評分沒有顯著性差異。這些信息對于構(gòu)建和優(yōu)化小鼠癲癇模型具有重要的指導(dǎo)意義。

例如：

1）腹腔注射氯化鋰(127mg／kg)，用以易化匹羅卡品的致癇作用；

2）18.5～23.5h后腹腔注射溴化甲基東莨菪堿(1mg／kg)，用以減輕致癇劑匹羅卡品的外周*堿能副反應(yīng)；

3）30min后腹腔注射匹羅卡品(60mg／kg)；

4）注射匹羅卡品后對大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)進行觀察，并根據(jù)Racine標(biāo)準(zhǔn)對每只大鼠的發(fā)作程度進行評定，癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)規(guī)定為連續(xù)的全身性發(fā)作(4或5級發(fā)作，4級主要表現(xiàn)為直立，5級主要表現(xiàn)為直立并摔倒，均同時伴有全身陣攣性發(fā)作)或多個4或5級發(fā)作，并且行為學(xué)在90min發(fā)作間期內(nèi)未恢復(fù)正常者。記錄發(fā)作的時間潛伏期(從給藥到SE開始的時間)。如給藥30min后無SE發(fā)作，重復(fù)給藥一次。

5）SE 90min后，腹腔注射**泮（4mg/kg）終止發(fā)作，以避免癇性發(fā)作致死。發(fā)作程度<4級的大鼠剔除。飼養(yǎng)1周后觀察，無自發(fā)性癲癇發(fā)作的大鼠剔除。給予抗癲癇藥物*妥英鈉(PHT)75mg/kg腹腔注射一次，觀察一周，仍出現(xiàn)癲癇發(fā)作的大鼠給予PHT 75 mg/kg腹腔注射一次，觀察一周，仍出現(xiàn)癲癇發(fā)作的為成功模型。

耐藥相關(guān)指標(biāo)研究  海馬組織，突觸前SV2A蛋白、突觸后PSD-95蛋白、GluR2、miR-485

參考

[1]張玲芝, 秦瀅, 吳連連, 等. 梨狀皮層注射紅藻氨酸建立癲癇小鼠模型[J]. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）, 2023,43(8):1094-1101.